骨癌痛大鼠中脑导水管周围灰质腹外侧区P2X7受体激活对D?丝氨酸释放的影响

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【作者】李鹏涛肖智文松李尤艳

【关键词】骨癌痛; 微透析; 中脑导水管周围灰质腹外侧区; P2X7受体;

【摘要】目的中脑导水管周围灰质腹外侧区（vlPAG）P2X7受体激活介入骨癌痛的形成和维持机制。文章拟建立骨癌痛大鼠模型,通过脑微透析结合ELISA技术观察vlPAG中P2X7受体激活对D-丝氨酸水平的影响。方法雌性SD大鼠42只,随机数字表法分成4组:正常对照组（n=12）、假手术组（n=12）、骨癌痛组（n=12）和P2X7受体特异性拮抗剂（A-438079）组（n=6）。骨癌痛组大鼠建立大鼠胫骨转移性骨癌痛模型,注入20μL含SHZ-88乳腺癌细胞的RPMI-1640培养基细胞悬液（癌细胞1×107个/0.5 mL）;假手术组注入等体积的经过处理的癌细胞（SHZ-88乳腺癌细胞在90℃沸水中持续20 min）,其余操作同骨癌痛组;正常对照组不进行任何处理。P2X7受体拮抗剂组前面操作同骨癌痛组,但灌流液中加入P2X7受体特异性拮抗剂A-438079。正常对照组、假手术组和骨癌痛组分别于同一时间点检测大鼠建模侧后足热痛阈值和机械痛阈值;免疫组化法检测各组21 d时间点大鼠vlPAG中P2X7受体阳性表达;正常对照组、假手术组、骨癌痛组和P2X7受体拮抗剂组使用ELISA法检测各组大鼠vlPAG透析液中D-丝氨酸变化。结果骨癌痛组大鼠机械痛阈值和热痛阈值在第5、7、10、14、18、21天均低于正常对照组和假手术组（P<0.01）正常对照组和假手术组大鼠vlPAG中有散在P2X7阳性表达,骨癌痛组大鼠P2X7受体阳性细胞数较正常对照组和假手术组显著升高（P <0.01）。骨癌痛组大鼠vlPAG中D-丝氨酸含量[（220.28±63.38）ng/mL]较正常对照组大鼠[（148.09±46.89）ng/mL]和假手术组[（147.32±51.44）ng/mL]大鼠明显升高（P<0.05）。P2X7受体拮抗剂组大鼠vlPAG中D-丝氨酸含量[（134.20±41.77）ng/mL]较骨癌痛组明显降低（P <0.05）。结论 vlPAG P2X7受体激活后促进D-丝氨酸释放进而参与大鼠骨癌痛机制的调节。

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